Biotynylacja Protocols

biotynylującegoproces łączenia biotynę lub witaminy H, białka lub innych cząsteczek. Ta procedura naukowa jest stosowany głównie w biotechnologii i biologii molekularnej z udziałem badań DNA, białka i antygeny , które są cząsteczkami system odpornościowy organizmu rozpoznaje jako najeźdźców . Protokoły Biotynylacja obejmują Biotynylacja przeciwciał i peptydów , a także Biotynylacja powierzchni komórkowej. Biotynylacja przeciwciał

połączyć biotynę wytwarzają białka przeciwciał, gdyantygen wchodzi korpus technicy stosować wodorowęglan sodu ( NaHC03 ) w pH 9 , sulfotlenek dimetylu ( DMSO) , Katowice

NHS - biotyna isubstancji o nazwie soli fizjologicznej PBS . Próbki miesza się z roztworem wodorowęglanu sodu, który następnie dodaje się do NHS- biotyna w DMSO. Roztwór następnie dodaje się do badanych przeciwciał i inkubowano w elemencie wyposażenia zwany rotor przez cztery godziny w temperaturze pokojowej lub przez noc w temperaturze 39,2 stopni Celsjusza. Na koniec,roztwór rozcieńcza się PBS.
Biotynylacja powierzchni komórkowej

protokołu biotynylacji powierzchni komórkowej technikami wykorzystującymi kultury tkankowej , buforowanej fosforanem soli fizjologicznej ( PBS ) na pH 7,4 i - sulfosukcynoimidylo -2 ( biotinamido ) etylo - 1 ,3 - roztworu buforowego do równoważenia ditiopropionianem kwasowość zawierający grupy aminowe, oraz TrisCl według Current Protocols in Protein komórki Science.The miesza się z biotyną i roztworu buforowego , dekantuje i odwirowuje . Stałe treść i konkretne białka są później analizowane na talerzu elektroforezy żelowej. Imperium Biotynylacja peptydów

Aby wykonać Biotynylacja peptydów ,odczynnik stosowany jest NHS - SS Biotyna , według Philipa Pasterza w "Przeciwciała monoklonalne : .Practical Approach " Peptydy są krótkie fragmenty aminokwasów , które tworzą molekuły proteiny i DNA. W tym protokole ,handlowego roztworu NHS- SS Biotyna rozpuszcza się w wodzie. Następniepróbki peptydu dodaje się do niej , wraz z kwaśnym węglanem sodu lub równowagi odczynu pH . Roztwór następnie inkubuje się na lodzie przez dwie godziny. Technicy mogą obserwować próbkę z lub bez cząsteczek biotyny . Imperium