Metody pomiarowe NADPH oksydaza

enzymu oksydazy NADPH jest identyfikowany jako producent reaktywnych form tlenu w trakcie procesu , w tym wzrost komórek mięśni gładkich naczyń. Te reaktywne są związane z szeregiem chorób, w tym nadciśnienia tętniczego , cukrzycy , raka i zapalenia , metody monitorowania aktywności tego enzymu jest krytyczny dla rozwoju możliwego do obróbki . NADPH oksydazy

oksydazy NADPH należy do rodziny enzymów , które pomagają z przeniesienia elektronu pomiędzy NADPH i tlenu . Jednakże oksydazy NADPH posiada unikalną zdolność wytwarzania reaktywnych form tlenu, w wyniku tej reakcji , w porównaniu do innych członków rodziny , gdzie reaktywnych form tlenu jest generowany za pomocą innych środków. Multimerycznym białko , oksydaza NADPH składa się z flavocytochrome b558 błoną , która jest wykorzystywana jako marker pomiaru.
Reaktywne formy tlenu ( ROS ), Generacja

głównym źródłem ROS , w szczególności nadtlenkiem wodoru , oksydaza NADPH produkuje małe ilości , ale przez jego konsekwentne izoformy wyrażonej w naczyniach krwionośnych , które są zaangażowane w procesy sygnalizacji. Ta spójna produkcja może ostatecznie przytłoczyć naturalny system antyoksydacyjny , powodując utratę związków ochronnych , takich jak tlenek azotu , apokolenie nawet mocniejszym ROS . Imperium Chemiluminescencja Metoda

Chemiluminescence umożliwia wysoce czułe , automatyczny pomiar aktywności oksydazy NADPH w szerokim zakresie stężeń. Podczas tego sposobu NADPH substrat dodaje się do próbki tkanki zawierającej oksydazę NADPH . Po reakcji ROS jest generowany i reaguje z lucigenina związek wykazuje działanie chemiluminescencyjnych , która jest mierzona . Luminescencji jest proporcjonalna do aktywności oksydazy NADPH , jakoenzym określa się szybkość reakcji.
Kinetic Analiza cytometrii przepływowej

tego sposobu , próbki tkanek są analizowane za pomocą cytometrii przepływowej. Szpik kostny jest oddzielona od próbki stosując zrównoważony roztwór soli Hanksa . Specyficzne przeciwciała wykrywające plamy i dodaje się do próbki w probówkach polistyrenowych . Próbkę inkubuje się następnie , przemyto zrównoważonym roztworem soli Hanksa , znakowane sondy molekularne i otrzymanej z cytometrii przepływowej. Rury wykonane są również kontrola w celu porównania i skalibrować cytometr przepływu . Maszyna pobiegł i pomiary rejestrowane . Imperium