TPA Purification Protocols

tkankowy aktywator plazminogenu lub TPA jestproteazą serynową typu , który jest w stanie zniszczyć białka skrzepów krwi. TPA znajduje się wewnątrz komórki, które pokrywają się naczyń krwionośnych . Protokoły TPA są częścią farmaceutycznej i medycznej, badania uderzeń , a także choroby serca i płuc , takich jak zator tętnicy płucnej i zawał mięśnia sercowego. Oczyszczanie TPA dotyczy izolowania tego białka z innymi cząsteczkami, przez szereg procesów , w tym chromatografii i elektroforezy . Oczyszczanie TPA z Hog nerek

protokół używany w badaniach fibrynolizyporecesem produkt koagulacji nazwie fibryny , związany z tworzeniem nowotworów. Technicy wyodrębnić TPA z acetonu suszono świńskiej nerki buforem octanu potasu, przy pH 4,2 . Potem dodać siarczan amonowy w celu wywołania wytrącania komórek. Dodają n- butylo- sefarozową do próbek, które są następnie analizowane na Chromatograf . Konkanawalinydodaje się również i chromatograph.y celu oddzielenia różnych białek jest wykonywane.
Oczyszczanie TPA z komórek jajnika chomika chińskiego i komórki E. coli

czystość białkami ważnym czynnikiem w powodzeniu doświadczenia biologiczne . Oczyszczony TPA jest dostępny w handlu , a tym samym oszczędza czas i uniknięcia ryzyka narażania eksperymentu ze względu na słabo oczyszczonym roztworze. Protokół ten obejmuje procesy oczyszczanie TPA u ssaka i komórki bakteryjne. Technicy wytrącić próbki komórek , przefiltrowania je i wykonać powinowactwo i analizy chromatografii na żelu . Później, przeanalizować i porównać wyniki, przed do produkcji komercyjnej . Imperium przejaw aktywnego TPA Ludzi w E. coli

sklarowane lizaty komórkowe są dodawane do lizyna - Sepharose , analizowane w Chromatograf i przemyto roztworem chlorku sodu . Inną próbkę nanosi się na drugą kolumnę do chromatografii zawierającą białka, które wiąże się z TPA z bardzo wysokim powinowactwem. Próbka z drugiej kolumny jest mieszana z roztworem cynku sefaroza . Uzyskane białko wykazuje ponad 90 procent czystości , według czasopisma " Applied and Environmental Microbiology ". Imperium