Western blot Protokoły

western blot sątypu blot białka , które jest używane w medycynie , laboratoriach biologii i innych dyscyplin naukowych na co dzień . Western blot , kiedy wykonane poprawnie , tosposób na studiowanie ekspresji białka w próbkach tkanek . Ponieważ nie może się różnic w parametrach każdej próbki , jestszereg protokołów, które powinny być stosowane w celu uzyskania dokładnych wyników. Wykonywanie Myjnie

inkubowanie błon w roztworach przeciwciała na odpowiedni czas , który zmienia się w zależności od przeciwciała rozwiązanie jest stosowane ENCOR Biotechnology stwierdzono, żemembrana powinna przechodzić trzykrotnym przemyciu temperatury pomieszczenia TBS . TBSrozwiązanie ma szczególne makijażu i pH do prania . Membrana powinna być myte przed każdym wprowadzeniem nowego roztworu przeciwciała .
Przygotowanie Barwienie Mieszanina

Według WesternBlotting.org , przygotowanie mieszanki barwiącej bezpośrednio przed zastosowaniem będzie członkowi osiągnąć najlepsze rezultaty . Istnieje wiele rodzajów rozwiązań barwienia , z których niektóre mogą być zakupione i niektóre z nich muszą być mieszane w laboratorium . Barwienie chemiluminescencji , według Encor Biotechnologii , dostarcza najwięcej informacji na plamę , ale jest także najbardziej kosztowne i wymaga ciemnię dla rozwoju . Peroksydaza chrzanowa Barwienie i fosfatazy alkalicznej Blottingu są inne możliwości barwienia . Niezależnie od tego, która metoda jest stosowana , przygotowanie mieszanki bezpośrednio przed użyciem jest niezbędna. Imperium stosując bufor

Po zastosowaniu wybranego rozwiązania , wykorzystanie barwienia zbuforem jest kluczem. W barwieniu chemiluminescencji , stosując octan powyżej powierzchni roztworu barwiącego jest protokół według WesternBlotting.org . Peroksydaza chrzanowa barwienia wymaga użycia buforu octanu amonu w celu uzyskania brązowego produkt barwiący. Bufor stosowany w fosfatazy alkalicznej Blot , który powinien utworzyć purpurowy produkt barwienia , jest bardziej skomplikowane do wykonania i można kupić już . Imperium