Celem analizy białek Expression
badanie białek jest ważnym procedura w biologii , prowadzone zarówno w laboratoriach diagnostycznych i badawczych w środowisku akademickim oraz w przemyśle . Diagnostyczna analiza ekspresji białka stosuje się do wykrywania obecności choroby lub nienormalnych warunkach fizjologicznych. W badaniach stosuje się go do wytwarzania białek biologicznie zaprojektowane do dalszych badań naukowych lub w opracowywaniu leków . Ekspresja białka
ekspresja białek jest bardzo prostewytwarzanie białka z określonej sekwencji aminokwasowej , która jest z kolei określony przez ustaloną sekwencją genową. Poznanie tych sekwencji umożliwiabadaczowi modyfikowanie białka w różnych sposób - na przykład przez umieszczenie znacznika fluorescencyjnego na białku więc może on zostać wykryty lub usunięcie fragmentów białka, które mogą zakłócić jego produkcji lub obróbki przez komórkę .
Zbiory Metody i narzędzia do analizy Protein Expression
ekspresja białka jest analizowane przy użyciu wysoce zaawansowanych i specjalistycznych technologii i procedur , takich jak ELISA, testy immunologiczne , spektrometrii masowej , i obrazowania . W większości przypadkówbiałko wykrywane pośrednio - na przykład, za pomocą przeciwciała, które wiąże się z nim, a następnie przy użyciu układu do detekcji wtórnego jej uwidocznienia . Podstawowa technika wykrywania białka jest Western biot , podczas którejbiałko jest prowadzony przez żelu agarozowym , a następnie przeniesiono na membranę. Jest on następnie " sondą " pozwalającprzeciwciało wiąże się z nim, aprzeciwciało poddaje się reakcji z roztworem chemicznym, takim jak srebrem , do wytwarzania obrazu z lokalizacji proteiny na membranie . Daje to wskazanie wielkości białka, czy jest on obecny w postaci wielokrotnych lub pojedynczych jednostek. Innym powszechnie stosowanym sposobem jest detekcja fluorescencyjna . Wiązania przeciwciała znakowanego fluorescencyjnym cząstki do białka pozwoli jej być wizualizowane za pomocą mikroskopu . Imperiumcelów analizy Protein Expression
Studiowanie ekspresja białka daje śledczym wskazanie , gdzie jest produkowany (np. wzór ekspresji i jej lokalizacja ) lub jego ilości ( tzn. jego tkanki lub poziomy komórkowe ) . Informacje te są wykorzystywane w patologii diagnostycznym , np.do wykrywania białka w moczu w celu określenia , czypacjent ma chorób nerek , takich jak choroby nerek, nefropatia cukrzycowa lub rurowego . W laboratoriach genetycznych eksperymentów klonowania genów zazwyczaj generują rekombinowany ( genetycznie zmodyfikowane) białek. Analiza tych syntetycznych cząsteczek jest niezbędne do weryfikacji sekwencji genowych albo sprawdzania mutacji, które mogą być lub mogą nie być pożądane. Przykładowo szczepionki są białkami wytwarzanymi przez sztucznie zmodyfikowane jednostki genów. Białka te muszą być dokładnie analizowane w celu zapewnienia , że geny zostały zmienione w celu poprawnego i odpowiedni sposób , tak aby uniknąć niepożądanych lub efekty toksyczne .
Protein Expression Analiza Western blot
analiza ekspresji białka z zastosowaniem analizy Western błot powstajebardzo rutynowo procedury laboratoryjne w celu oceny naukowcy klonowania genu i wytwarzanie rekombinowanego białka. Na przykład , w dziedzinie biologii molekularnej i inżynierii genetycznej genów pochodzących z różnych gatunków ( np. myszy i człowieka ) są połączone ze sobą i wprowadzane do komórki bakteryjnej , zdolnego do ekspresji białka. W celu zapewnieniaprawidłowego białka jest generowany , jego ekspresja muszą być analizowane za pomocą techniki western blotting. Western blot jest również stosowany w patologii medycznej diagnozować chorobę szalonych krów i HIV .
Protein Expression Analiza metodą cytometrii przepływowej
komórek metodą cytometrii przepływowej wymaga się zabrudzonych fluorescencyjnych przeciwciał , które wiążą się do białka wyrażanego na powierzchni lub od wewnątrz komórki. Jest on stosowany w badaniach farmaceutycznych znalezienie cząsteczek ( cytokiny ), które są specyficzne dla określonego zestawu komórek i zaangażowane w sygnalizację komórkową i komunikacji. Jest to ważne dlatego , że wpływ leków na normalnej fizjologii komórki i funkcji mogą być monitorowane w trakcie opracowywania leków i badań klinicznych . Imperium