Jak przygotować płytki agarowe

Płyty biologii molekularnej i bakteriologii wykorzystanie agar do hodowli mikroorganizmów , takich jak bakterie do eksperymentowania. Agar jestśrodek, który zestala się , lub żeli,pożywkę cieczy wymagane przez mikroorganizm przeżyć i rozwijać. Po przeniesiono na płytkę agarową , bakterie rosną do różnych kolonii ( przy hodowli w niskim stężeniu ) lub smar (jeśli hodowane przy wysokich stężeniach ) i może być zebrany do analizy. Biolodzy przygotować talerze agar, jakproces wymaga dostępu do odczynników laboratoryjnych i maszyn klasy i dobrego zrozumienia biologii molekularnej i sterylnych technik . Rzeczy, które musisz Katowice Rękawice
fartuchu
Maseczka
Palnik Bunsena
wyciągiem laminarnym Obrazów
szalkach Petriego sterylne 10g BACTO tryptonu Obrazów 5g ekstraktu drożdżowego
15g agarozowym
1 ml 1N NaOH Obrazów sterylnej wody destylowanej
szklana butelka
taśma autoklaw autoklaw suplementy , np. antybiotyki, takie jak ampicylina
Pokaż więcej instrukcji
1

Nosić odpowiednie wyposażenie ochronne , w tym rękawice, w fartuchu i masce twarzy i odkażania wszystkich powierzchni . Praca przy palniku Bunsena , albo korzystnie w sterylnej komorze z przepływem laminarnym. Zapobiega to w powietrzu zanieczyszczeń z popadania w agarze .
2

Wyjmij stos płytek Petriego z ich opakowań , lecz z wyjątkiem przepakowywania płytki agarowej. Etykieta na zewnętrznej powierzchni naczynia ( nie) z pokrywą typu agaru i datą przygotowania. Ułożyć płyty jako jednej warstwie z nienałożonym do nalewania agaru łatwiejsze .
3

Wymieszać BACTO tryptonu , ekstrakt drożdżowy i agarozowym razem, a następnie dodać wodorotlenek sodu roztwór . (NaOH ) Dodanie sterylnej wody destylowanej, aby uzyskać 1 litr pożywki . Przenieść roztwór do butelki z co najmniej objętości 1,5 . Luźno przykręcić pokrywy butelki i etykiety datę sporządzenia oraz nazwę mediów . Umieścić pasek taśmy w autoklawie na butelki i to w autoklawie przez 25 minut. Niechbutelka fajnie nie niższa niż 45 stopni Celsjusza ( lub będzie twardnieje przedwcześnie ) , ale nie wyższej niż 50 stopni Celsjusza . Można przechowywać butelki ochłodzeniu i zestaleniu agaru w 4 stopniach Celsjusza , a następnie ogrzano do momentu skroplony . Jeśli wymagane dla danego eksperymentu lub szczepu bakterii , dodaj odpowiedni rodzaj i ilość dodatku takie jak antybiotyki . Jeślisą zbyt gorące, suplementy zostaną zniszczone , tak starannie sprawdzić temperaturę mediów przed kontynuowaniem.
4

Wlać odpowiednią objętość agar do połowy napełnić naczynie podczasagar jest jeszcze ciepłe i skroplone . Upewnić się, żepowierzchnia jest całkowicie pokryta . Nie wlewać zbyt dużo albo niechagar dotrzeć na szczyt naczynia . Płyty należy przechowywać w sterylnej atmosferze , pozwalającpalnika Bunsena lub kaptur przepływ laminarny do pracy ciągłej . Pozwalają ustawić płyty , a następnie zastąpienie ich pokrywy .
5

Osusz Płytki agarowe na około 30 minut do godziny w piekarniku ustawić nie wyższej niż 37 stopni Celsjusza . Alternatywnie , możesz zostawić je w wyciągiem laminarnym przez trzy minuty lub na odkazić stole laboratoryjnym w strefie niskiego ruchu , który nie jest przewiewny na dzień lub dwa . Wysuszeniu płytki bakteryjnej zatrzymuje żadnego rozwiązania umieszczonego na powierzchni agaru z zewnątrz i po prostu rozcieńczenie zsuwaniu , zamiast tworzyć kolonie , które przyklejają się do agar .
6

Starannie przechowywać płyty wciemno i na 4 stopni Celsjusza . Stos suchych płyt Agar z ich dna , aby umożliwić wyraźne zobaczyć etykiet i zapobiegające drobnoustrojów i resztek od upadku na powierzchnię agaru i ich zanieczyszczenia . Umieścić naczynia z powrotem do ich opakowań , przykryć folią aluminiową i taśmę zamknął opakowania . Opisać zapakowane płyty z ich treścią i datą sporządzenia . Można przechowywać płyty do dwóch miesięcy, a powinien wyrzucić je po tym. Imperium