Podstawy

PCR Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR ) jestmetodą replikacji DNA. Metoda ta jest nazwana polimerazy DNA , enzym wykorzystywany do katalizowania procesu replikacji DNA. Kary Mullis opracował technikę w 1984 roku i otrzymał Nagrodę Nobla w dziedzinie chemii za pracę w 1993 roku. Zastosowanie PCR

Typowe zastosowania PCR DNA ( m.in. odcisków palców , w którym fragmenty DNA są izolowane i porównywane z istniejących danych ) , analiza próbek bardzo małych ilościach (co umożliwia naukowcom odtworzyć organizmów wymarłych i zmarłych postaci historycznych ) i rozpoznania choroby (w tym wirusowego DNA i badania nad rakiem ) .
Zbiory Komponenty PCR

niezbędne składniki i odczynniki z reakcji PCR są : genomowego DNA (szablon do replikacji ); Dwa startery (jeden do przodu i jednym biegiem ) komplementarne do sekwencji matrycy DNA; Koktajl reakcji ( w tym polimerazy Taq i roztworu buforowego , który zapewnia realną środowisko, w którym następujereakcja ); isubstrat dla enzymu Taq (nukleotydy , które pomogą " budować " pojedynczych nici ) .

Etapy PCR

Etapy reakcji są : denaturacji (w którym temperatura jest podnoszona do rozdzielenia nici matrycy DNA); Hybrydyzacji startera ( podczas której temperatura jest chłodzony zachęcić pływająca sekwencje starterów do przestrzegania pojedynczych nici matrycy DNA ); i rozszerzenia ( podczas któregopolimeraza Taq przylega do podkładu i wykorzystuje darmowe pływające nukleotydy replikować każdy samodzielnie szablonu DNA Strand ) . Powtarzając ten proces kilka razy, za każdym replikowane będą izolować od oryginalnej sekwencji matrycy DNA . Każde powtórzenie wykładniczo zwiększa ilość replikowanego DNA , dopóki nie jestwystarczająca ilość żądanego eksperymentu. Dla optymalnej temperatury i innych warunków , zobacz "Designing programy PCR " Yale University w Resources, poniżej.
I Etapy PCR

reakcja może być również opisane w trzech etapach : Amplifikacja (w którym DNA jest wykładniczo replikacji ); Poziom - Off ( podczas którychtraci aktywność polimerazy Taq ); a plateau (w którym to czasie nie zaobserwowano dalszego produkt może być wytworzony w obecnym reakcji ) . Na interaktywnej demonstracji reakcji PCR , zobacz University of Utah " PCR Virtual Lab " w zasobach poniżej. Imperium