Jakiej substancji używasz do namnażania się wirusów w laboratorium?
Wirusy są pasożytami wewnątrzkomórkowymi, co oznacza, że mogą replikować się jedynie w komórkach organizmu żywiciela. W warunkach laboratoryjnych wirusy są zazwyczaj hodowane w hodowlach komórkowych, które przygotowuje się z żywych komórek wyizolowanych z organizmu. Konkretny rodzaj użytej hodowli komórkowej zależy od badanego wirusa. Na przykład niektóre wirusy mogą rosnąć tylko w określonych typach komórek, takich jak komórki ludzkie lub komórki zwierzęce.
Proces namnażania wirusów w hodowlach komórkowych składa się z kilku etapów:
1. Pozyskanie wirusa: Pierwszym krokiem jest uzyskanie wirusa, który chcesz zbadać. Można tego dokonać poprzez izolację wirusa z zakażonego organizmu, takiego jak pacjent lub zwierzę. Alternatywnie, wirusa można uzyskać z materiału laboratoryjnego.
2. Przygotowanie hodowli komórkowej: Następnym krokiem jest przygotowanie hodowli komórkowej. Wiąże się to z uzyskaniem odpowiedniego rodzaju komórek i hodowaniem ich w pożywce hodowlanej dostarczającej komórkom składników odżywczych niezbędnych do przeżycia. Pożywkę hodowlaną zazwyczaj uzupełnia się surowicą zawierającą czynniki wzrostu, które pomagają komórkom rosnąć.
3. Infekowanie komórek: Po przygotowaniu hodowli komórkowej wirus wprowadza się do niej. Można tego dokonać dodając wirusa bezpośrednio do pożywki hodowlanej lub stosując technikę zwaną transfekcją. Transfekcja polega na wprowadzeniu wirusa do komórek przy użyciu środka chemicznego lub metody fizycznej.
4. Inkubacja: Po zakażeniu komórek wirusem hodowlę inkubuje się w odpowiedniej temperaturze i wilgotności. Umożliwia to replikację wirusa wewnątrz komórek. Okres inkubacji może się różnić w zależności od badanego wirusa.
5. Pozyskiwanie wirusa: Po replikacji wirusa do wystarczającego poziomu, wirus jest zbierany z hodowli komórkowej. Można tego dokonać poprzez zebranie pożywki hodowlanej i odwirowanie jej w celu usunięcia komórek. Następnie zbiera się i przechowuje supernatant zawierający wirusa.
Wirus zebrany z hodowli komórkowej można następnie wykorzystać do dalszych badań, takich jak charakteryzacja, oczyszczanie lub opracowywanie szczepionki.