Parafina Osadzanie Protokół

Naukowcy zwykle trzeba utrwalić próbki biologiczne do sekcji je. Ułatwia to naukowcom dodawać barwniki , przeciwciała i sondy na próbkę biologiczną. Zmniejsza to także nakładkę różnych warstw komórek . Naukowcy stosować wosk parafinowy w postaci twardej osnowy do cięcia , gdyżparafina nie miesza się z wodą. Parafina jesttypu węglowodoru. Próbki biologiczne zawierają wody , więc naukowcy muszą odwodnić próbek przy użyciu coraz bardziej stężone kąpiele etanolu. Ksylen

Naukowcy usunąć etanol przy użyciu ksylenu . Potem użyć stopionego wosku parafinowego usunąć ksylen. Dla mikroskopii świetlnej , skrawki parafinowe są zwykle grube pięć urn. Parafina nie jest wystarczająco trudne dla cieńsze plastry. Naukowcy nawodnić tkanki przy użyciu ksylenu , potem etanolem . Potem opłukać próbki biologicznej z wodą destylowaną w celu uniknięcia zanieczyszczenia .
Fixing

zatopionych w parafinie tkankach są zwykle ustalone za pomocą obojętnej buforowanej formalinie , która jestkomercyjna wersja formaldehydu . Obejmuje paraformaldehydu i metanol , co zapobiega formaldehydu z konwersji do kwasu mrówkowego. Cienkie plasterki tkanki potrzebują 48 godzin od stabilizacji w temperaturze pokojowej w optymalnej histologii , który jestbadanie mikroskopowe anatomii . W przeciwnym przypadku ,tkanka twardnieje i staje się krucha . Przed obróbką ,tkanka jest zazwyczaj przechowywany w 70 procent etanolu w temperaturze 4 stopni Celsjusza .

Parafinowe Procesory

Naukowcy często wykorzystują procesory parafinowe wysłać tkanki poprzez kąpiele , które stopniowo odwodnić materiał przed gorącej parafiny może wejść przez tkanki . Naukowcy uruchomić procesor noc. Procesor jest podgrzewana tylko do tkanki przez określony czas , zależny od tkanki uczynić nie staje się twardy i kruchy. Procesor wykorzystuje się podciśnienie , które przyspiesza przenikanie parafiny i usuwa się pęcherzyków powietrza . Po przetworzeniu tkanki przechowywane w kasetach w temperaturze pokojowej.
Wosk

parafinowy topi się na jedną godzinę przed dodaniem tkanki. Całe kasety umieszczone w wannie 65 stopni Celsjusza przez 15 minut w parafinie . Radiator zimno aluminium chłodzi parafinę na 20 minut . Gdy wosk lub pęknięcia tkanki nie są wyrównane ,naukowiec topi parafinę i powtarza proces .
Cięcia

cięcia tkanek ,naukowiec dostaje kąpieli wodnej do 35 do 37 stopni Celsjusza . Woda jest świeża i dejonizowanej . Bloki są umieszczone zakryte na bloku lodu lub radiator przez 10 minut. Ostrze przecina blok na sekcje . Dwa problemy , które mogą wystąpić, są biedni ribboning i wzory fragmentacji . Gdyfragment próbki ,woda jest zbyt gorąca . Czyblok nie dobrze wstążki, należy umieścić go w bloku lodu i firma się wosk przed rozpoczęciem ponownie. Imperium