Protokół dla DAPI Stain
oznacza DAPI do chemicznego 4' - 6 - diamidyno - 2 - fenyloindolem i służy do zabarwienia dwuniciowego DNA. Związek tworzy niebieskie kompleksy fluorescencyjne z jąder komórek i tak jest używany powszechnie podkreślić strukturę komórek . Rodzaj i gęstość barwienia również może zidentyfikować martwe lub umierające komórki . Przygotowanie DAPI rozwiązanie
Roztwór DAPI najpierw należy rozcieńczyć w roztworze roboczym . Na przykład , 10 mg produktu Invitrogen DAPI musi być zmieszany z 2 ml wody dejonizowanej , a następnie dalej rozcieńczano do stężenia 300 nano - molarnego ( kierunki są obecne w produkcie ) z roztworem soli buforowanej fosforanem (PBS ) .
Przygotowanie próbki
Fix próbkę jako odpowiedni do rodzaju próbki , które mają być testowane na slajdzie . Dodać 300 mikrolitrów roztworu roboczego DAPI do próbki i inkubuje przez jedną do pięciu minut. Przemyć slajd PBS . Imperium Analizowanie
pomocą mikroskopu fluorescencyjnego spojrzeć na próbki slajdów zamontowane . W DAPI - zabarwione jądra mogą być oznakowane niebieskim fluorescencja . Imperium