Procedury ekstrakcji DNA
komórkowych Liza
Liza jestdziałanie komórek, które są dosłownie złamane , powodując ich zawartość do rozlewania się do analizy. Komórki zawierające próbkę DNA ekstrahowany może być otwierane , tym samym pozwalając na uzyskanie dostępu do lizatu lubpłynu wewnątrz . Osiąga się to różnymi sposobami ,z których najbardziej powszechne jest sonikacji . Sonikacji jestprocesem, w którym skrapla się dźwięku stosuje się do komórek , a tym samym ich mieszanie i łamaniu międzycząsteczkowe reakcje. Inne metody, które wywołują rozpad obejmują wprowadzenie wirusa, który rozkłada go otworzyć od wewnątrz; enzymy, które jedzą daleko na jego powierzchni; i osmoza , która polega na umieszczeniu komórek w wodzie , dzięki czemupłyn wewnątrz nich , aby jego wyjazd na zewnątrz , gdzie można je pobrać . Imperium Membrana Usuwanie
Następnie lipidów w błonie komórki muszą zostać usunięte. Lipidy są rodzaje tłuszczów, wosków, monoglicerydów , fosfolipidów i innych naturalnie występujących substancji cząsteczkowej, używanych jako elementy strukturalne do błon komórkowych , co nadaje im pewną sztywność. Są one usuwane przez płukanie lizatu CELLS ' w roztworze detergentu , zazwyczaj postaci kwasu chromowego .
Białko usuwania
lipidy zostały usunięte zpowodzeniem lizat , to teraz ważne , aby usunąć wszelkie pozostałe białka . Osiąga się to przez dodanie co jest znane jako proteazy . Proteazy to specjalny enzym przeznaczone do podziału podanych białek . To działanie nazywa proteolizy , aproteazy powoduje hydrolizy ( podział ) obligacji , które posiadają aminokwasy razem. Aminokwasy tworzą białka , a bez ich konfiguracji ,białko które rozkłada się .
Wytrącenie
To w końcu czas, aby zobaczyć czystego DNA . Może to być wykonane przez zanurzenie lizatu do lodowato zimnego alkoholu , zazwyczaj etanolu. Ponieważ DNA jest rozpuszczalny w alkoholu , to zlepiają ze sobą. Gdymieszanina miesza się z metalową łyżkąDNA widoczny zawinięcia metalem , podobny białej bawełny . Jest to znane jako wytrącanie z DNA znanych jako osad DNA.
Izopropanol
Wraz z etanolu , izopropanolu jest również czasami stosowany sposób wyodrębnienia osadu DNA. Na dodatniej stronie , to jest bardziej skuteczne niż etanol , uzyskując wyższe stężenie DNA stosowane . Jednak , jest także znacznie mniej lotne i wymaga więcej czasu do wyschnięcia . Można również zauważyć , żeDNA nie mogą stosować również do łyżki lub rurki przy użyciu izopropanolu . Imperium