Metoda badania kwasów nukleinowych

Badanie kwasów nukleinowych prowadzi się w diagnostyce medycznej , w celu wykrywania patogenów , takich jak wirusy lub bakterie . Testy te są znacznie szybciej , a zatem umożliwiają lekarzowi na początku leczenia pacjenta, który normalnie mógłby mieć poczekać na potwierdzenie infekcji przy użyciu testów opartych na przeciwciałach bardziej długotrwałe i żmudne . Proces ten jest także znany jako test amplifikacji kwasu nukleinowego , i zawiera metody znanej jako " odwrotnej transkryptazy " amplifikacja na drodze reakcji łańcuchowej polimerazy . Ponieważ jest towysoce wyspecjalizowane procedury naukowe , zaawansowana wiedza i doświadczenie w zakresie technik biologii molekularnej i jest potrzebna teoria. To, czego potrzebujesz
probówek PCR
PCR praca cykliczna
Pipety i końcówki
filtry Rękawice
Komórki
Trizol lub innego odczynnika ekstrakcji RNA
bufor PCR
polimeraza Taq
startery RT-PCR w stężeniu 1 mg /ml Foto RNazy wody
dNTPs Zbiory MgCl2 Zbiory Losowe starterów na 1,8 mg /ml stężenia Foto odwrotnej transkryptazy SuperScript II

Zobacz więcej instrukcji
przetwarzanie i przygotowywanie RNA
1

komórki zbiorów z odczynnikiem do ekstrakcji RNA , takich jak Trizol . 1 ml jest wystarczająca do zbierania komórek z jednej studzience sześciu dołkach płytki do hodowli tkankowej. Komórki dokładnie pipetowano górę i w dół w celu ich homogenizacji i przeprowadza procedurę ekstrakcji jak opisano w arkuszu Trizol . Pokrótce , ekstrahowano chloroformem , a następnie odwirować w celu oddzielenia fazy DNA , białek i RNA. Przypomnij tylko bezbarwną fazę RNA i osad z izopropanolu . Po inkubacji , że wirówki i oczyszczenie otrzymanego osadu z kilku praniach etanolu. Następnie ponownie zawiesić osad w wolnej od RNazy wody.
2

odwrotnej transkrypcji denaturacji dokładnie 5 mikrogramów RNA w 65 stopniach Celsjusza w 10 mikrolitrów (