HPLC Technika

stoi HPLC dla wysokosprawnej chromatografii cieczowej , standardowej procedury jakościowej i ilościowej analizy stosowane w laboratoriach analitycznych . HPLC jest niezawodny i powtarzalny , co sprawia, że​​preferowana technika rozdzielania , identyfikacji i ilościowego określenia cząsteczek ze złożonych mieszanin obu składników chemicznych i biologicznych . Cztery Elementy

techniką HPLC składa się z czterech głównych elementów . Po pierwsze,system dostarczania rozpuszczalnika (fazy ruchome) , które przenosi próbki przez kolumnę jest ważna, ponieważwpływa na zdolność polaryzacji systemu do oddzielania cząsteczek . Kolumnę chromatograficzną zwykleszklana kolumna pionowa , która jest wypełniona adsorbantami . Po drugie,absorbujące (znane także jako fazy stacjonarnej , ponieważ nie porusza się ) jest zwykle żel krzemionkowy lub tlenek glinu . Po trzecie,układ do wprowadzania próbki składa się z pewnego rodzaju wtryskowym wprowadzić próbkę do analizy i rozpuszczalnikowego systemu dostarczania. Czwarty składnik jestdetektor .
Zbiory Detektory

typ czujnika użyć, zależy od rodzaju próbki technicy są uruchomione i jakie cząsteczki starają się izolować . Kryteriaprzy wyborze technik używa detektora m.in. selektywność, stosunek sygnału do szumu , ograniczenia wykrywania, zakres liniowy , czas stały , drift i objętości komórek . Powszechnie stosowane detektory m.in. detektorów ultrafioletowych - widoczne , spektrometry masowe , współczynnikach załamania , detektory fluorescencyjne lub urządzenia rozpraszające światło par . Imperium Procedura

Włącz wykrywacz , pompy (które są stosowane do przenoszenia nacisku dodanie fazy ruchomej przez fazę stacjonarną ) ikomputer, który rejestruje i drukowania chromatogram . Wyboru odpowiedniego programu , w celu zebrania żądanych danych. Wtryskiwać próbkę do portu wtryskiwania. Miej oko na ciśnienie . Każdy typ kolumny posiada maksymalne ciśnienie ; Nie należy przekraczać lub separacji nie występuje. Wydrukować chromatogram i analizować wyniki . Pod koniec każdego cyklu , ważne jest , aby wypłukać z portu , aby zapobiec gromadzeniu się wtrysku , który może tworzyć zatory .
Zbiory Rodzaje

hydrofilowa chromatografia oddziaływań wykorzystujepołączone polarny faza stacjonarna iniepolarne , mieszający się z wodą faza ruchoma do oddzielania cząsteczek, w oparciu o polaryzacji. Technika ta ma zdolność rozdzielania próbki kwaśne, zasadowe i obojętne w jednym układzie faz chromatogram.Normal stosuje się polarny fazę stacjonarną i niepolarne , niewodne fazę ruchomą aby rozdzielić izomery strukturalne ( cząsteczek o tym samym wzorze cząsteczkowym , które są łączone ze sobą w atomów różne sposoby ) z odwróconymi fazami . jestnajpowszechniej stosowanym typem HPLC . Używa niepolarne fazy stacjonarnej i wodnego nieco polarny fazę ruchomą . Sposób ten jest powszechnie stosowany przez producentów farmaceutycznych zakwalifikować leków przed chromatografii wykluczania release.Size oddziela cząsteczek w zależności od ich wielkości, mogą określić strukturę chromatografii jonowymiennej proteins.Ion bazuje na przyciąganie pomiędzy jonami w substancję rozpuszczoną i naładowanych miejsc związana na fazie stacjonarnej.
Zastosowanie

HPLC , jest użyteczne w wielu zastosowaniach. Może być stosowany do analizy materiałów farmaceutycznych , co jest pomocne w badaniu nowych leków , a także oczyszczenie istniejących. Jest również używany do analizy płynów ustrojowych , pestycydy , materiałów wybuchowych i innych materiałów. Mimo, że jest to popularne techniki biomedycznej , biochemicznego i farmaceutycznego badania , jest również stosowany w kosmetykach, żywności , przemysłu ochrony środowiska i energii . Imperium