Dlaczego jest zimno alkoholu stosowane w badaniach DNA ?
Zimny alkohol jest używany do oddzielania DNA z roztworów wodnych . Pozwala toDNA , które mają być oczyszczane w dalszych badań genetycznych. Dodanie alkoholu do roztworu zawierającego DNA jestw prosty sposób uzyskanie czystego DNA wymagane i niskich temperatur spowalniać enzymy, które mogą rozkładać DNA daje lepsze wyniki ekstrakcji . Rozkładają się ściany komórkoweKomórki ściany muszą być zniszczone , aby osiągnąć DNA wewnątrz .
procedury ekstrakcji w celu otrzymania czystego DNA pozbyć wszystkich cząsteczkowej i chemicznych składników tkanki, z którejjest DNA wyodrębniania . Pierwsze kroki obejmują lizy lub zniszczenia ścian komórkowych . To może być wykonane przy użyciu różnych środków chemicznych, które są ługu do błon komórkowych , ale nie są szkodliwe dla DNA. Komórki mogą być również działaniu ultradźwięków , homogenizowany , lub połączysz się do niszczenia błony .
Usuwanie Lipidy
Po ściany komórkowe zostały zniszczone ,detergenty dodaje się pozbyć tłuszczów i olejów, które składają się na błonę komórkową . Detergenty powodują tłuszcze i oleje do rozpuszczenia w roztworze .
Usuń Białka
Białka i enzymy mogą być strawione przez dodanie do roztworu proteazy . Proteazy rozkładają białka na małe peptydy i aminokwasy.
Osad DNA
Dodawanie zimnego alkoholu w roztworze powoduje wytrącenie DNA i kruszywo . DNA może być zebrane przez wirowanie próbki i wylewanie ciekłej warstwy. DNA powinien występować w niewielkiej osadu na dnie probówki do wirowania .
Oczyszczono DNA
DNA można przemyto ponownie zawieszając go w zimnym alkoholu rozwiązanie i ponowne odwirowanie go kilka razy, aby uzyskać bardzo czystą próbkę DNA . Typowe alkohole stosowane do wytrącenia DNA są etanol i izopropanol . Proces ten pozostawia bardzo czystą próbkę do rygorystycznych testów DNA .