Chloramfenikol płytkach preparatywnych

Chloramfenikol jestantybiotykiem o szerokim spektrum działania , który zabija mikroorganizmy bakteryjne poprzez zakłócanie ich zdolności do replikacji. Ten antybiotyk został opracowany początkowo do zwalczania infekcji u ludzi , ale , według Drug.com , używany jest tylko teraz , w tej publikacji , w ostateczności , gdy inne leki nie działają ze względu na poważne skutki uboczne , takie jak niedokrwistość aplastyczna , anemia niedorozwój , małopłytkowość i granulocytopenia . Chloramfenikol jest użyteczny w laboratorium badawczym eksperymentów biologii molekularnej. Gdy wytwarza się na chloramfenikol płyty , może być stosowany do wykrywania stężenia bakteryjnego lub izolować konkretne szczepy bakterii do dalszych eksperymentów. Rzeczy, które musisz
wody destylowanej
chloramfenikol Obrazów 1,0 proc tryptonu Foto ekstrakt drożdżowy 0,5 proc
1,0 procent chlorku sodu (NaCl ), pH 7,0
95 procent etanolu
Agar
2 - litrowej kolby
mieszadła magnetycznego
Średnich magnetyczne mieszadło
lateksowe lub nitrylowe rękawice
skali laboratoryjnej
autoklaw 30 sterylne 10 cm płyty
niebieski Znakowanie pióro
parafilmem Obrazów, folia aluminiowa
taśmy autoklaw
Pokaż więcej instrukcji
1

Umieść na parze lateksowe lub nitrylowe rękawice do przygotowania bulionu LB . Bulion LB jestwspólna skrótem Lysogeny bulionie lub bulionie Luria i to jest stosowane jako medium do wzrostu hodowli bakterii. To może być wykonane od podstaw w laboratorium , lub w celu zaoszczędzenia czasu można go kupić od dowolnego dostawcy giełdzie biologii molekularnej .
2

Umieść arkusz papieru ważenie na wadze. Nacisnąć przycisk zerowania na skali , tak żegramatura papieru nie są zawarte w końcowej masy . Dodaj tryptonowej małych ilości na raz , ażdo osiągnięcia 10 g . Następnie złożyć papier ważyć w połowie z tryptonu w centrum . Podnieś papier ważyć i ostrożnie używać złożonego papieru jak lejek , aby dodać do kolby tryptonu 2 L . Poniżej przedstawiono procedurę Odważyć 5 g wyciągu z drożdży, 10 g NaCl i 15 g agar .
3

Rzuć mieszadełko do kolby i centrum kolbę na płytce mieszadła magnetycznego . Dodaj tyle wody destylowanej , aby doprowadzić roztwór do 1 litra .
4

Włączyć mieszadło na płytę i oglądać mieszadło . Płyta powinna być ustawiona z właściwą prędkością , aby umożliwićmieszadło przenieść w umiarkowanym tempie bez utknięcie na stronach kolby . W razie potrzeby dostosuj ustawienia . Pozostawićroztwór siedzieć na płycie , aż do całkowitego rozpuszczenia reagentów .
5

Wyłącz mieszadle i rozciągnąć 3 cal kwadratowy kawałek folii Parafilm na górze kolby do okładka i chronić kolbę z wszelkich zanieczyszczeń lub rozlania . Następnie pokrywa Parafilm kawałkiem folii aluminiowej i dodać element znakowania taśmy autoklawie na wierzchu folii.
6

Umieścić roztwór w autoklawie w cyklu cieczy przez 20 minut przy 15 psi do sterylizować .
7

Wyjąć kolbę z autoklawu . To będzie bardzo gorąco. Pozwolić, aby roztwór schłodzić do około 55 stopni Celsjusza , pozwalając, by siedzieć w temperaturze pokojowej , lub umieszczając kolbę w kąpieli 65 stopni Celsjusza wody .
8

Spray i przetrzeć pracę powierzchnia z 95 procentami etanolu , aby zapobiec zanieczyszczeniu . Jest to takżedobry pomysł, aby zmienić swoje rękawice przed obsługą płyt .
9

Markboczne i pokrywa z każdej płyty z pionowym niebieskim paśmie korzystania z pióra oznakowania . Oznacza to, że płyty zawierają bulion LB i chloramfenikol .
10

dodać wystarczającą antybiotyk chloramfenikol w roztworze tak, żestężenie osiągnie pożądaną wysokość , w zależności od bakterii będzie pracować. Powszechne jest 100ug/ml stężenie końcowe . W tym stężeniu , dodać 1 ml chloramfenikol akcji ( w 25mg/ml ) . Wirować kolbę w ruch kołowy , lub umieścić go na płycie magnes mieszać przez 1 do 2 minut , aby upewnić się, że jest dobrze wymieszane .
11

Wytrzeć usta kolby etanolem , , a następnie wlać do rozwiązania płyt , aż do połowy wypełnione roztworem . Niech płytki twardnieją , obejmuje każdą płytkę pokrywką i przechowywać je do góry nogami na 4 stopni Celsjusza , aby zapobiec ich wysychaniu . Imperium