Procedury znakowania przeciwciał

procedury znakowania przeciwciał są techniki stosowane w naukach biologicznych do wykrywania obecności poszczególnych cząsteczek. Procedury te korzystają z relacji między antygenem i przeciwciałem . Antygenami mogą być dowolne cząsteczki, żeukład odpornościowy rozpoznaje . Przeciwciało jestw kształcie litery Y , które specyficznie rozpoznaje białko jeden antygen. Biologowie stosować związek wiązania pomiędzy przeciwciałem i antygenem w celu określenia lokalizacji określonej cząsteczki w próbce. ELISA

ELISA lub testu immunoenzymatycznego jestbiologicznym techniki laboratoryjne stosuje się do wykrywania obecności antygenu lub przeciwciała. Jest to często stosowane w diagnostyce medycznej do określenia , czypacjent jest narażony na infekcję określonego typu . Łódź

przeprowadzenia ELISA— próbkę zawierającą interesujący antygen — jest zakotwiczone stałe wsparcie w naczyniu . Rozwiązanie z przeciwciałem komplementarny dodano do naczynia , iprzeciwciało wiąże się z antygenem. Następnie nadmiar przeciwciała zmyte , pozostawiając tylko par antygen-przeciwciało - związany w naczyniu . Mogą być wizualizowane przez dodanie cząsteczki fluorescencyjne , które wiąże się z przeciwciałem i wydziela sygnał wizualny, który może być następnie ilościowo . W ten sposób ,obecność i ilość antygenem można pośrednio określić.
Western Blot

Western blot jestinny rodzaj techniki stosowane w celu wykrycia specyficzne białka w próbce oraz określenia ich wielkość. Po pierwsze, próbki białka zostały rozłożone wielkości na żelu przy użyciu elektroforezy w żelu. W tym momencie, białka nie są widoczne gołym okiem. Naukowcy następnie przeniesienie białek na membranę i dodano roztwór zawierający przeciwciała z antygenem. Po odmyciu nadmiaru roztworu ,przeciwciało wiąże się z antygenem na membranie . Łódź

Dodanie przeciwciała wtórnego powodujeprzy lub pierwotne przeciwciało emitować światło. Pomiar ilości światła wysyłanego pozwala badaczom na ustalenie obecności antygenu , jej wielkość w stosunku do innych białek i ich względne stężenie .
Immunohistochemia

Immunohistochemia jesttechniką, która pozwala badaczom wizualizacji położenia białka w próbce tkanki. Small plasterki próbki przygotowano ipierwszorzędowe przeciwciało , które wiąże się z antygenem będącym przedmiotem zainteresowania , jest dodany. Nadmiar roztworu jest zmyta , zanim naukowcy dodać przeciwciało wtórne . Przeciwciało to wiąże się z pary pierwotnego przeciwciała z antygenem i emituje światło sygnalizacji położenia z antygenem będącym przedmiotem zainteresowania . Łódź

Naukowcy użyciu mikroskopu wizualizować w którymantygen jest w komórce. Wiele różnych przeciwciał , z których każdy specyficzne dla określonego białka , można stosować w celu określenia względnego położenia różnych cząsteczek w komórce. Jeśli jest tocel , różne kolorowe drugorzędowe przeciwciała są używane do rozróżniania różnych cząsteczek będących przedmiotem zainteresowania .
Cytometria przepływowa

fluorescencji aktywowane lub sortowania komórek — FACS — jesttypu cytometrii przepływowej do oddzielania różnych typów komórek w roztworze. Każdy inny typ komórki jest " etykietą " z przeciwciałem specyficznym dla danego typu komórek. Każde z tych przeciwciał wydziela żądaną barwę światła. Urządzenie agitates roztwór złamać jej na poszczególne krople i wykorzystuje czujnik do wykrywania barwy każdej kropli . Urządzenie sortuje komórki, emitowanego koloru , dzieląc je na podstawie typu białka , które zawierają. Metodologia FACS umożliwia naukowcom sortować i ilościowego komórek interesów swoich pytań badawczych .
Immuno - mikroskopia elektronowa

Normalna mikroskopia elektronowa pozwala naukowcom badać strukturę komórki powiększony do 1 miliona razy . Immunologicznej mikroskopii elektronowej wykorzystuje właściwości wiązania przeciwciała antygenu wizualizację poszczególnych białek w skrawkach tkankowych bardzo cienkie . Po pierwsze , przeciwciała z dołączonymi cząstkami złota mogą wiązać się z antygenem. Mikroskop elektronowy następnie wizualizuje cząstki złota , dając badaczom obrazu , gdziebiałko jest zlokalizowane w komórce . Łódź

Chociaż mikroskopu immuno - elektronowego jest proste w teorii , jest technicznie bardzo trudne i kosztowne do zastosowania, ograniczając jego popularność stosowania w wielu biologicznych programów badawczych . Imperium