Dlaczego mieszanie E. Coli z toluenem powinno odbywać się delikatnie?
Zaburzenie błony komórkowej: Toluen może rozpuszczać lipidy tworzące błonę komórkową, co prowadzi do wycieku zawartości komórek i utraty żywotności komórek. Energiczne mieszanie może zwiększyć kontakt między toluenem a komórkami, powodując bardziej rozległe uszkodzenie błony komórkowej.
Siły ścinające: Energiczne mieszanie może wytworzyć siły ścinające, które fizycznie uszkadzają komórki. Siły te mogą powodować rozpadanie się lub pękanie komórek, co prowadzi do śmierci komórki. Delikatne mieszanie pomaga zminimalizować siły ścinające i chroni komórki przed uszkodzeniami mechanicznymi.
Utrata plazmidów: Wiele szczepów E. coli używanych w eksperymentach laboratoryjnych zawiera plazmidy, które są małymi okrągłymi cząsteczkami DNA. Plazmidy mogą zawierać interesujące geny lub markery oporności na antybiotyki. Energiczne mieszanie może spowodować wycięcie lub utratę plazmidów z komórek. Delikatne mieszanie pomaga zachować plazmidy i utrzymuje pożądane cechy genetyczne szczepu E. coli.
Zmniejszona wydajność transformacji: Podczas pracy z genetycznie zmodyfikowanymi szczepami E. coli często konieczne jest wprowadzenie do komórek nowego DNA w procesie zwanym transformacją. Energiczne mieszanie podczas transformacji może zmniejszyć efektywność pobierania DNA przez komórki i zmniejszyć liczbę skutecznie transformowanych kolonii. Delikatne mieszanie zwiększa szanse na udaną transformację.
Większa żywotność komórek: Delikatne mieszanie pomaga utrzymać ogólną żywotność i integralność komórek E. coli. Żywotne komórki są niezbędne do różnych dalszych zastosowań, takich jak ekspresja białek, analiza DNA i badania funkcjonalne.
Dlatego delikatne mieszanie E. coli z toluenem ma kluczowe znaczenie, aby zminimalizować uszkodzenia komórek, zachować żywotność komórek i zapewnić powodzenie kolejnych eksperymentów
