Jak stopień trawienia BAPNA zmienia się w czasie?

Trawienie BAPNA (benzoilo-DL-arginino-p-nitroanilidu) przez trypsynę przebiega zgodnie z typową kinetyką enzymu Michaelisa-Mentena. Szybkość trawienia początkowo wzrasta z czasem, w miarę jak w reakcję angażuje się więcej cząsteczek enzymu. Jednakże wraz ze spadkiem stężenia substratu w miarę upływu czasu tempo trawienia maleje. Zależność pomiędzy ilością strawionego BAPNA a czasem można opisać następującym równaniem:

[BAPNA]t =[BAPNA]0 - k[E][BAPNA]0*t

Gdzie:

- [BAPNA]t:Ilość BAPNA strawionego w czasie t

- [BAPNA]0:Początkowe stężenie BAPNA

- k:Stała szybkości reakcji

- [E]:Stężenie trypsyny

- t:Czas

Wykres [BAPNA]t w funkcji t zazwyczaj przedstawia krzywą hiperboliczną. Początkowa faza liniowa krzywej reprezentuje okres, w którym szybkość reakcji jest stała i proporcjonalna do stężenia enzymu. W miarę postępu reakcji krzywa wyrównuje się z powodu wyczerpywania się substratu i zmniejszającej się szybkości trawienia.

Mierząc początkową prędkość (Vo) reakcji i wyznaczając stałą Michaelisa-Mentena (Km) za pomocą analizy graficznej (np. wykresy Lineweavera-Burka lub Hanesa-Woolfa), można scharakteryzować kinetykę enzymu i uzyskać wgląd w reakcję katalityczną skuteczność i powinowactwo substratowe trypsyny do BAPNA.