PBMC Protokół

Zamrożone komórki jednojądrzaste krwi obwodowej ( PBMC ) sączęstym źródłem próbek do badań , który obejmuje immunoterapii i reakcji na szczepionki . Chociaż niektóre protokoły są ograniczone do izolacji i ujemnych etapów procesu , a inne obejmują procedury rozmrażania . Procedura izolacji i zamrażania Procedura

związek handlową promować oddzielenie jest umieszczona w każdej rurce do wirówki 50 ml i probówki odwirowywano przez trzydzieści sekund. Nasadki rur krwi opryskuje alkoholem przed otwarciem , a po obróbce antykoagulant krew przenosi się następnie za pomocą pipety do probówek do wirowania . Warstwę osoczu krwi jest zasysane za pomocą pipety .
Zamrażania

komórki z poprzedniego etapu , a następnie odwirowuje się w zbuforowanym roztworze soli fizjologicznej trzy razy. Po morfologii , próbki odwirowuje się w zawiesinie w pożywce do zamrażania . Próbki w pożywce do zamrażania są podzielone między kriofiolek obok w jednym kwot ml . Fiolki są przechowywane przez noc w Foto

-70 ° C w zamrażarce i przeniósł się do długoterminowego przechowywania w ciekłym azocienastępnego dnia. Imperium Bezpieczne Rozmrażanie

kriofiolek są przenoszone z ciekłego azotu do 37 ° C w łaźni wodnej i próbkę pozostawia się do rozmrożenia 01:59 minut. Transport ciepła nośnika dodaje się do każdej fiolki. Rozcieńcza się zawiesinę komórek wirowano przez siedem minut. Liczba i żywotność komórek są sprawdzane , Jeśli komórki potrzebują koncentracji, okazy odwirowuje siedem minut. Próbkę rozcieńcza się do roztworu roboczego i odpoczywać przez dwanaście do osiemnastu godzin przed rozpoczynających badanie w określonym protokołem . Imperium