Dlaczego w teście peroksydacji lipidów TCA przeprowadza się kruszenie?

W teście substancji reagujących z kwasem tiobarbiturowym (TBARS) na peroksydację lipidów, kruszenie próbki tkanki przeprowadza się z kilku powodów:

Aby ułatwić homogenizację:Zmiażdżenie próbki tkanki pomaga w rozbiciu struktur komórkowych i uwolnieniu lipidów do otaczającego podłoża. Ten proces homogenizacji zapewnia równomierną dystrybucję lipidów i ich dostępność dla reakcji z kwasem tiobarbiturowym (TBA).

Aby usprawnić ekstrakcję lipidów:Zmiażdżenie próbki tkanki zwiększa powierzchnię lipidów, umożliwiając lepszą ekstrakcję do rozpuszczalnika organicznego (zwykle mieszaniny chloroformu i metanolu) stosowanego w teście TBARS. Ten etap jest kluczowy dla odizolowania lipidów od innych składników komórkowych i ułatwienia ich reakcji z TBA.

Aby uwolnić produkty peroksydacji lipidów:Zmiażdżenie próbki tkanki może pomóc w uwolnieniu produktów peroksydacji lipidów, takich jak dialdehyd malonowy (MDA), które często są związane z białkami komórkowymi lub innymi makrocząsteczkami. Rozrywając te wiązania, kruszenie umożliwia uwolnienie i późniejsze oznaczenie ilościowe MDA i innych TBARS.

Kruszenie próbki tkanki optymalizuje homogenizację, ekstrakcję lipidów i uwalnianie produktów peroksydacji lipidów, co prowadzi do dokładniejszych i bardziej wiarygodnych pomiarów peroksydacji lipidów w teście TBARS.